Trường Đại học tập TP. Sài Gòn Khoa Khoa học tập môi trường Tiểu luận môn học: PHÂN TÍCH MÔI TRƯỜNGĐề tài: TÌM HIỂU MÁY HPLC •Nh

Views 130 Downloads 18 File kích thước 2MB

DOWNLOAD FILE

Recommkết thúc Stories


Bạn đang xem: Sắc ký lỏng hiệu năng cao pdf

*

HPLC

HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC) 1. Tujuan percobaan : o Dapat menjelaskan dan menggunakan HPLC o Dapat men

173 3 283KBRead more


*

*

HPLC

HPLC Gandum hitam adalah makanan dan obat-obarã dan sereal tanaman berfungham mê gandomain authority. Spesies soba ditanam kebanyakan Tar

36 1 236KBRead more


*

*

HPLC

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) I. Tujuan Percobaan Setelah melakukan percobaan ini, mahasiswa diharapkan dapat

99 0 255KBRead more


HPLC

Teknik Kimia Politeknik Negeri MalangHPLC (High Performance Liquid Chromatography) Della Fajar P.. Dinni Hayyu Farid Jat

139 4 1MBRead more


HPLC

H P. L C (HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY) Tujuan : a) Mempelajari cara kerja alat HPLC b) Menganalisa sampel seca

21 0 448KBRead more




Xem thêm: Đặt Mua Vé Máy Bay Hà Nội Tokyo Giá Rẻ, Vé Máy Bay Giá Rẻ Hà Nội Đi Tokyo

HPLC

LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ANALISIS I HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC) atau KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (

13 2 337KBRead more


Citation preview

Trường Đại học Sài Thành Khoa Khoa học tập môi trường thiên nhiên Tiểu luận môn học: PHÂN TÍCH MÔI TRƯỜNG Đề tài: TÌM HIỂU MÁY HPLC • Nhóm: 2 Lớp: DKM1091 Thành viên thực hiện: Mã sinc viên: Đỗ Hồng Vân 3109340144 Nguyễn Thị Như Mai 3109340073 Huỳnh Trần Chiến Công 3109340015 Trương Thị Tâm Tâm 3109340 GV Hướng dẫn: GS.TS. Phạm Nguyễn Kyên Tuyến 1 HPLC TỔNG QUAN 2 3 4 CẤU TẠO NGUYÊN TẮC HOẠT ĐỘNG ỨNG DỤNG CỦA MÁY HPLC I. TỔNG QUAN HPLC ( High Performance Liquid Chromatography) là phương pháp sắc đẹp ký lỏng hiệu năng cao. Trước tê điện thoại tư vấn là phương thức sắc ký kết lỏng cao thế (High Pressure Liquid Chromatography). Phương thơm pháp này thành lập từ thời điểm năm 1967-1968 trên cơ sở cách tân và phát triển cùng cách tân từ bỏ phương thức dung nhan ký kết cột cổ xưa. Hiện nay nó áp dụng không nhỏ trong tương đối nhiều ngành kiểm định đặc biệt là vận dụng mang đến lĩnh vực kiểm tra thuốc . Và nó hiện tại là mức sử dụng ý hợp tâm đầu trong đối chiếu các thuốc nhiều nguyên tố cho phép định tính và định lượng . Pmùi hương pháp sắc đẹp ký kết (Được phát minh bởi vì đơn vị sinch thiết bị học tập fan Nga – Mikhail Tswest ) :  Kỹ thuật bóc (seperation) những cấu tử vào một hệ đồng thể (khí hoặc lỏng)  Cân bởi độ đậm đặc của các cấu tử trong hai trộn xúc tiếp nhau: trộn tĩnh (stationary phase) cùng trộn rượu cồn (điện thoại phase)  Sự phân bóc dựa vào vận tốc kéo theo (elution) khác nhau của các cấu tử trong cột (column)  Một đầu dò (detector) sống Áp sạc ra của cột cho phép định lượng liên tục những cấu tử trong hỗn hợp đầu Sắc cam kết phân bóc tách (Elution chromatography) Phân bóc dung nhan ký: Các hóa học tan bị rửa sang một trộn tĩnh nhờ việc chuyển động của trộn rượu cồn qua nó Mẫu Pha động Detector t1 t2 t3 t4 Tín hiệu detector t0 t0 t1 t2 t3 t4 Thời gian Sắc ký vật dụng (Chromatogrames) Điều khiếu nại để thu được sắc cam kết đồ: - Đầu dò (Detector) được đính thêm đặt ở điểm cuối của cột - Đầu dò tương thích cùng với những hóa học cần phát hiện nay Sắc ký kết đồ: Biểu diễn sự đổi mới thiên của biểu hiện ra theo thời gian hoặc theo thể tích tiêu tốn của pha đụng Ưu điểm của cách thức nhan sắc cam kết - cũng có thể so sánh mặt khác các phù hợp chất - Không cần làm cất cánh tương đối mẫu mã - Độ phân giải cao dựa vào quy trình tách bên trên cột - Độ nhạy cao (ppm-ppb) nhờ đầu dò - Thể tích mẫu mã so với nhỏ tuổi (1-100µ L) Khái niệm về chuyên môn dung nhan cam kết lỏng tính năng cao Sắc ký kết lỏng tính năng cao là 1 trong những cách thức phân chia tách trong số đó pha động là chất lỏng với trộn tĩnh đựng vào cột là hóa học rắn đã có phân loại bên dưới dạng đái phân hoặc một hóa học lỏng trùm lên một chất có rắn, hay như là một chất mang đã làm được thay đổi bằng links hoá học cùng với những team chức cơ học . sản phẩm điện thoại phase (Pha động) Stationary phase (Pha tĩnh) - Quá trình bóc phụ thuộc vào đặc điểm chất hóa học, thiết bị lý cùng hóa lý của những hóa học. - Dựa bên trên 2 thừa trình: Hấp phụ Giải hấp phụ - Xảy ra tiếp tục giữa 2 pha: Pha tĩnh: chất rắn hoặc lỏng, duy trì hóa học so sánh Pha động: chất lỏng (1 chất hoặc tất cả hổn hợp các chất), kết hợp và di chuyển chất so với - Sắc cam kết lỏng chia thành 2 nhóm Sắc ký kết lỏng áp suất hay (nhan sắc ký kết cổ điển) Sắc ký kết lỏng áp suất cao (Sắc ký kết lỏng tính năng cao: HPLC) Dựa vào bản chất của quy trình sắc đẹp cam kết, HPLC phân chia thành: SK phân bổ SK ghnghiền cặp ion Sk thảo luận ion SK pha hay HPLC SK trộn đảo khi nối cùng với đầu bởi vì (detector), HPLC mang đến phép: - Định tính: dựa vào thời gian lưu - Định lượng: phụ thuộc độ cao hoặc diện tích S peak II.CẤU TẠO MÁY HPLC Trong đó : 1- Bình cất dung môi pha đụng 2- Bộ phận khử khí 3- Bơm cao áp 4- Bộ phận tiêm mẫu mã ( thủ công bằng tay xuất xắc Autosample) 5- Cột sắc ký kết ( Pha tĩnh ) ( nhằm ngòai môi trường xung quanh tốt trong cỗ điều nhiệt ) 6- Detector ( thừa nhận biểu lộ ) 7- Hệ thống máy vi tính gắn phần mềm dìm,biểu thị cùng sử lý dữ liệu và tinh chỉnh và điều khiển hệ thống HPLC. 8- In tài liệu . 1 - Bình đựng dung môi - Hiện tại trang bị HPLC thường có 04 con đường dung môi vào đầu bơm cao áp .Cho phép bọn họ sử dụng 04 bình chứa dung môi thuộc 1 lần nhằm cọ giải theo Phần Trăm ước muốn và tổng xác suất dung môi của 4 đường là 100 % . - Tuy nhiên theo kinh nghiệm thì họ ít khi áp dụng 04 đường dung môi và một dịp nhưng họ đưa ra thực hiện về tối nhiều là 3 với 2 mặt đường khiến cho hệ pha đụng luôn được xáo trộn đồng nhất rộng,hệ trộn độüng đơn giản rộng nhằm quy trình rửa giải định hình . - Hiện 04 con đường dung môi giao hàng đa số đến câu hỏi rửa giải Gradial dung môi theo thời gian với công tác tạo NGUỒN CUNG CẤPhường PHA ĐỘNG (MOBILE PHASE): LÀ BÌNH ĐỰNG DUNG MÔI HOẶC DUNG MÔI CHẠY MÁY 2 Sở khử khí Degasse : Mục đích của bộ khử khí nhằm vứt bỏ các bọt nhỏ dại còn còn sót lại trong dung môi trộn hễ . Nếu như vào quy trình đối chiếu cơ mà dung môi trộn hễ còn sót những bong bóng khí thì một số hiện tượng kỳ lạ sau đây vẫn sảy ra: - Tỷ lệ pha đụng của các mặt đường dung môi đem bất ổn sẽ khiến cho thời hạn giữ của Peak biến hóa . - Trong trường hòa hợp bong bóng vô số bộ khử khí cần yếu sa thải không còn được thì có thể Pump sẽ không hút được dung môi lúc ấy áp suất ko lên với đồ vật sắc đẹp cam kết sẽ hoàn thành hoạt động . 3- Bơm cao áp (khối hệ thống cung cấp dung môi): - Bơm trộn cồn vào cột tách bóc - Điểu khiển tốc độ cái, áp suất của pha rượu cồn - Máy nhan sắc ký kết lỏng của bọn họ hiện giờ thông thường có áp suất buổi tối đa 412 Bar (1at = 0.98Bar). Tốc độ chiếc 0.1-9.999 ml/phút . HỆ THỐNG ĐIỀU KHIỂN ÁPhường SUẤT HOẶC TỐC ĐỌ DÒNG PHA ĐỘNG, CÒN GỌI LÀ HỆ THỐNG CUNG CẤPhường. DUNG MÔI: LC PUMP 4 Bộ phận tiêm mẫu ( injection valve): Để chuyển chủng loại vào cột so sánh theo phương pháp ko ngừng loại tung . Với bề mặt của l bóp là 5 - 100µ l . Có 02 biện pháp mang chủng loại vào trong cột : Bằng tiêm mẫu thủ công (tiêm bằng tay) và tiêm chủng loại tự động (Autosample) . BƠM MẪU BẰNG TAY BƠM MẪU TỰ ĐỘNG (AUTO SAMPLE) 5. Cột tách bóc (Colume) LÒ CỘT (COLUME OVEN): DÙNG ĐỂ ĐIỀU KHIỂN NHIỆT ĐỘ CỘT TÁCH CỘT TÁCH: LÀ NƠI XẢY RA CÁC QUÁ TRÌNH TÁCH CHẤT, GỒM CỘT PHÂN TÍCH VÀ CỘT BẢO VỆ - Cột bóc tách gồm kích thước khác biệt - Chiều dài: 10 – 25cm - Đường kính: 2 – 5milimet 5 Cột tách : Cột cất pha tĩnh được xem như là trái tyên của hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao. - Cột pha tĩnh thông thường có tác dụng bằng vật liệu thép không rỉ ,chiều dài cột khoảng 10 -30centimet ,đường kính trong 1-10milimet ,hạt hóa học nhồi cỡ φ = 5-10 µ m.(mà còn còn có một trong những trường đúng theo quan trọng đặc biệt về form size và kích thước hạt....) - Với chất nhồi cột cỡ φ = 1.8 -5 µ m có thể sử dụng cột nlắp ( 3-10 cm ) và nhỏ dại (đường kính vào 1-4.6 mm) nhiều loại cột này còn có tính năng tách cao. - Chất nhồi cột phụ thuộc vào lọai cột với mẫu mã dung nhan cam kết - thường thì chất nhồi cột là Silicagel (pha thuận) Hoặc là Silicagel đã làm được Silan hóa hoặc được bao một tấm mỏng dính cơ học ( pha đảo ) , bên cạnh đó fan ta còng cần sử dụng các các loại phân tử khác như : Nhôm Oxit,Polyme xốp,hóa học Bàn bạc ion. * * Đối cùng với một số trong những phương thức đối chiếu yên cầu cần bao gồm ánh sáng cao hoặc tốt rộng ánh nắng mặt trời chống thì cột được đặt vào bộ phận điều nhiệt (Oven column) 6 .ÑAÀU DOØ (DETECTOR): COÙ NHIEÀU LOAÏI KHAÙC NHAU TUØY THEO MUÏC ÑÍCH PHAÂN TÍCH. DUØNG ÑEÅ PHAÙT HIEÄN CHAÁT VAØ ÑÒNH LÖÔÏNG : UV-VIS, HUYØNH QUANG, ÑOÄ DAÃN, ÑIEÄN HOÙA, KHOÁI PHOÅ … 7. HEÄ THOÁNG GHI NHAÄN VAØ XÖÛ LYÙ TÍN HIEÄU (INTERFACE, SOFTWARE, PC) : DUØNG ÑEÅ THU THAÄP.. VAØ TÍNH TOAÙN CAÙC KEÁT QUAÛ. III. NGUYÊN TẮC HOẠT ĐỘNG MÁY HPLC - Mẫu chất lỏng được đưa vào phòng bơm mẫu mã tiếp đến được bơm auto vào cột tách. - Dựa bên trên sự phân bố tiếp tục các cấu tử hóa học so sánh lên nhì pha: một pha hay đứng yên ổn, có chức năng hấp phụ chất so sánh hotline là trộn tĩnh, một pha di chuyển sang trộn tĩnh Điện thoại tư vấn là pha động. Do những cấu tử hóa học so với gồm ái lực không giống nhau với pha tĩnh, bọn chúng dịch chuyển với tốc độ khác nhau và bóc ra khỏi nhau. - Các quy trình tách bóc trong sắc cam kết lỏng:  Quá trình quan trọng tuyệt nhất trong phương thức sắc ký kết  Những cân đối động xảy ra thân trộn tĩnh và pha đụng trong cột dung nhan ký kết  Là sự vận chuyển cùng phân bố tiếp tục của chất so với từ đầu cột mang đến cuối cột  Chất so với luôn luôn phân bố giữa 2 pha, trong những số đó pha rượu cồn luôn tung qua cột tách với một vận tốc cố định  Hiệu trái của quá trình bóc tách phụ thuộc không ít vào liên hệ giữa các hóa học vào pha tĩnh cùng pha rượu cồn  Mục đích chủ yếu của dung nhan cam kết là bóc cùng định tính các hóa học trong các thành phần hỗn hợp chất phức tạp  Quá trình tách bóc diễn ra trong cột sắc đẹp ký kết column Vật liệu nhồi cột 3- 5µ m Quá trình bóc tách mixed sample điện thoại phase column Hỗn vừa lòng chất tách bóc ngoài nhau vậy nào ? Flow Pha tĩnh - Sau Lúc những cấu tử bóc thoát ra khỏi nhau vẫn thứu tự bước vào detector, tại đó chúng được chuyển thành biểu lộ năng lượng điện. Tín hiệu này được khuyếch đại rồi chuyển sang bộ ghi. Các bộc lộ được xử lý sinh sống đó rồi đưa quý phái thành phần in cùng lưu hiệu quả. - Trên dung nhan thứ nhận được, sẽ sở hữu những tín hiệu ứng với những cấu tử được bóc tách Hotline là peak. Thời gian lưu giữ của peak là đại lượng đặc trưng (định tính) đến chất phải bóc tách. Còn diện tích peak là thước đo định lượng đến hóa học phải so sánh. -Thời gian hóa học so với bị pha tĩnh lưu lại (thời gian lưu) đưa ra quyết định bởi:  Bản hóa học của pha tĩnh, kết cấu và đặc điểm của chất đối chiếu.  Bản hóa học với yếu tố của trộn động dùng để rửa giải chất phân tích thoát ra khỏi cột nhan sắc ký (pha tĩnh). - Ghi lại toàn thể quá trình tách bóc sắc ký của hỗn hợp hóa học đối chiếu  sắc cam kết vật dụng gồm nhiều peak. - Điểm sáng của peak đối chiếu :  Các peak có thể tách tách nhau hoàn toàn  Chập nhau 1 phần  Chập nhau trọn vẹn - Sắc cam kết vật dụng đề đạt quá trình bóc sắc đẹp ký vào cột tốt hay là không tốt. • Tách tốt: tất cả hổn hợp tất cả từng nào chất  gồm từng ấy peak lẻ tẻ không chập nhau • Chất như thế nào bị lưu lại mạnh sẽ được rửa giải ra ở đầu cuối, chất giữ gìn kỉm đã ra trước • Tuỳ từng chất nên phân tích và các điều kiện đối chiếu để chọn những detector khác biệt. Ứng dụng của HPLC - Chủ yếu đuối xác định các vừa lòng hóa học cơ học cạnh tranh cất cánh hơi trong nhiều đối tượng khác nhau: + Amino acid + Acid hữu cơ + Thuốc trừ sâu + ….